- 刘秋瑾;白长胜;尹珺伊;张军;王岩;田秋丰;王欢;曹禹;王振;薛沾枚;江波涛;钟鹏;
【目的】筛选具有抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)活性的乳酸菌，为降低家禽尿酸水平提供参考。【方法】测定26株乳酸菌细胞内容物(CFE)对XOD的体外抑制能力，从中筛选出抑制率较高的菌株进行细胞代谢物(CFS)对XOD抑制率的测定，并对其人工胃肠液耐受性、抗菌药物敏感性、安全性等特性进行评价及分子生物学鉴定。【结果】4株乳酸菌A2、A6、SC、SN的CFE对XOD的抑制率分别为23.41%、27.45%、24.47%、27.23%,CFS对XOD的抑制率分别为14.26%、17.02%、22.34%、19.57%。4株乳酸菌经人工胃肠液处理后的活菌数保持在10~8 CFU·mL~(-1)以上；对头孢菌素类(头孢哌酮、头孢呋辛)、大环内酯类(红霉素、罗红霉素)、青霉素类(阿莫西林、氨苄西林、青霉素)、恶唑烷酮类(利奈唑胺)抗菌药物敏感；基于16S rDNA序列分析，A2菌株鉴定为副干酪乳杆菌，A6菌株鉴定为植物乳杆菌，SC菌株鉴定为短乳杆菌，SN菌株鉴定为鼠李糖乳杆菌；小鼠分别连续腹腔注射A2、A6、SC、SN菌液两周后，未见死亡及器官病变。【结论】成功筛选出能够抑制XOD活性的4株乳酸菌，其具有良好的益生性和安全性。
2024年06期 v.53 754-762页 [查看摘要][在线阅读][下载 1674K] [下载次数：799 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 赖铭勇;
【目的】嗜水气单胞菌是危害斑鳜养殖生产的主要病原之一。研究斑鳜感染嗜水气单胞菌后，其肠道组织基因表达水平的变化，解析鱼体对细菌性感染的免疫应答分子机制，为防控淡水鱼类细菌性疾病提供依据。【方法】用嗜水气单胞菌感染斑鳜6 h后，利用Illumina Hiseq 6000测序平台对斑鳜肠道组织进行RNA-seq测序，并利用生物信息学方法对数据进行分析。【结果】感染组和未感染组斑鳜肠道组织存在1 077个差异表达基因(DEGs),包括669个上调DEGs和408个下调DEGs。其中，与免疫相关的上调DEGs主要有基质金属蛋白酶3(MMP3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17F(IL-17F)、正五聚蛋白3(PTX3)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)、C型凝集素域家族4E(CLEC4E)、胆固醇-25-羟化酶(CH25H)和激活转录因子1(ATF1)等。基因本体(GO)富集分析显示，DEGs主要富集在免疫反应激活信号通路、免疫应答调节细胞表面受体信号通路、T细胞活化的正调控过程以及细胞修复和调节过程上。京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析显示，上调DEGs主要富集在多种疾病发生、发展过程和免疫代谢相关信号通路上。实时荧光定量PCR验证结果表明，7个随机选取的与免疫相关的DEGs的表达量与RNA-seq测序结果存在一致性。【结论】感染组与未感染组斑鳜肠道组织MMP3、IL-1β、PTX3、NLRP6、CLEC4E表达量的差异较为显著，可能是参与斑鳜肠炎发生的关键候选基因。
2024年06期 v.53 763-771页 [查看摘要][在线阅读][下载 1807K] [下载次数：355 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 赵佳梅;杜蓥蓥;曾丽;曾靖棋;周梦圆;陈颖清;秦凤远;李健;潘慧青;马玉芳;
【目的】研究太子参多糖(PHPS)对卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠肠道免疫应答的影响，为了解PHPS能否增强小鼠机体的免疫应答能力提供依据。【方法】将72只健康清洁级(SPF)雌性ICR小鼠随机分成空白对照组(CK组)、OVA免疫对照组(OVA组)、铝佐剂阳性对照组(AL组)及PHPS各剂量组[50 mg·kg~(-1) PHPS(PHPS-L)组、100 mg·kg~(-1) PHPS(PHPS-M)组、200 mg·kg~(-1) PHPS(PHPS-H)组],每组12只小鼠。试验第1～5天和第16～20天，PHPS各剂量组小鼠灌胃对应剂量的PHPS,其余各组均灌胃双蒸水；试验第6天和第21天，CK组小鼠按0.2 mL·只~(-1)的剂量腹股沟皮下注射无菌PBS,AL组小鼠按0.2 mL·只~(-1)的剂量腹股沟皮下注射OVA与铝佐剂的混合液，其他组小鼠均按0.2 mL·只~(-1)的剂量腹股沟皮下注射OVA溶液；试验第36天采用颈椎脱臼法处死小鼠，采集样品，制作十二指肠、空肠、回肠切片检测小鼠肠道形态结构和上皮内淋巴细胞数量，检测小鼠肠道细胞因子(IL-6、TNF-α)和分泌性免疫球蛋白A(SIgA)的含量，以及IL-6、TNF-α mRNA的转录水平。【结果】(1)与OVA组相比，PHPS各剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度和绒隐比提高，PHPS-M组十二指肠、PHPS-H组空肠、PHPS各剂量组回肠的隐窝深度显著降低(P<0.05);同时，PHPS各剂量组十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞数量均有所增加。(2)与OVA组相比，PHPS各剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠IL-6、TNF-α的含量增加，SIgA含量显著增加(P<0.05)。(3)与OVA组相比，PHPS各剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠IL-6、TNF-α mRNA的转录水平显著上调(P<0.05)。【结论】PHPS能在一定程度上改善肠道形态结构，促进肠道上皮内淋巴细胞分泌，调节相关免疫分子的释放与表达，从而增强肠道黏膜免疫反应，提高小鼠对OVA的免疫应答能力。
2024年06期 v.53 772-778页 [查看摘要][在线阅读][下载 2033K] [下载次数：464 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：0 ] - 刘立荣;许高琳;郑娱;游泽龙;王全溪;
【目的】建立基于重组酶介导的核酸等温扩增(RAA)的侧流层析试纸条(LFD)方法，用于快速诊断兔出血症病毒(RHdV)2型(RHdV-2)。【方法】采用生物信息学软件分析RHdV-2、RHdV 1型(RHdV-1)基因组，筛选RHdV-2特异且保守的片段，设计RAA-LFD探针与特异性引物，以筛选最适引物及其浓度；对RAA-LFD检测的最适反应温度和时间进行优化，并对该方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价及临床样品检测。【结果】同源性分析表明，RHdV-2的VP60基因存在特异且保守的序列。基于VP60基因设计3对引物，发现上游引物序列为5′-TCATTTGTACCCTTCAGCGGTACCACCATCC-3′、下游引物序列为5′-CCCGGCTGTTGTCTGGTTTATGCCATTT-3′的扩增效果最好，引物与探针混合液的最适浓度为5.000μmol·L~(-1)。用LFD-RAA方法检测RHdV-2的最适反应温度为39℃,最适反应时间为30 min。敏感性检测结果显示：以RHdV-2 VP60重组质粒为模板的最低检出量为6.7×10~3 ng·μL~(-1)。用建立的RAA-LFD方法对RHdV-1的检测结果呈阴性，对RHdV-2的检测结果呈阳性，表明该方法的特异性良好。重复性检测结果显示，同一批次和不同批次试剂盒的检测结果均一致，表明重复性好。31份临床样品检测结果显示，5份为RHdV-2阳性样品。【结论】建立的检测RHdV-2的RAA-LFD方法具有简捷、易操作的特点，适合养殖场对RHdV-2的快速诊断。
2024年06期 v.53 779-785页 [查看摘要][在线阅读][下载 1437K] [下载次数：178 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 荆欣;胡颖;臧贺;宋宇轩;李坤泽;叶道有;康婧;陈大福;郭睿;
【目的】通过鉴定和解析中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂幼虫肠道细胞自噬与凋亡相关基因及其剪接本，为进一步的功能研究提供依据。【方法】使用Blast工具将中华蜜蜂剪接本与Nr数据库进行比对，以鉴定自噬与凋亡相关基因及其剪接本。采用Astalavista软件挖掘相关基因的可变剪接(alternative splicing, AS)事件。通过RT-PCR验证AS事件的真实性。利用TAPIS pipeline软件预测相关基因的可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)位点。使用TBtools软件预测APA位点上游的基序(motif)。【结果】鉴定出中华蜜蜂工蜂幼虫肠道中与自噬相关的49个基因及其170种剪接本，以及与凋亡相关的76个基因及其347种剪接本。鉴定出细胞自噬相关的8个基因的88次AS事件及凋亡相关的15个基因的339次AS事件。PCR扩增结果符合预期，证实了随机选择的3种类型AS事件(3′端可变剪接、外显子跳跃、内含子保留)的真实性。预测结果表明，自噬相关的36个基因含有1个或多个APA位点，但在这些APA位点的上游未鉴定到任何motif;而凋亡相关的55个基因含有1个或多个APA位点，并在其上游识别出多个motif,具有一致性序列：NNNDNDNNDNDNDNNDNDNDNNDNDNNNNDDHNNN, NNNNNVNNDNNNNNDHNNHNNNNVNNNH。【结论】中华蜜蜂工蜂幼虫肠道细胞自噬与凋亡相关基因可通过AS和APA形成数量丰富的剪接本，自噬和凋亡相关基因中最丰富的AS类型分别是3′端可变剪接和外显子跳跃，含1个APA位点的基因数目最多。
2024年06期 v.53 786-791页 [查看摘要][在线阅读][下载 1570K] [下载次数：174 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 赵玉薇;黄成;邢佳敏;陈兴汉;张虹;
【目的】探明疣吻沙蚕成熟精子及卵子的超微结构特征，为其繁殖生物学的基础研究提供依据。【方法】利用扫描电镜和透射电镜观察疣吻沙蚕成熟精子及卵子的超微结构。【结果】疣吻沙蚕精子全长为(39.80±1.24)μm,由头部、中段、尾部3个部分构成。精子头部主要由顶体和细胞核组成，顶体呈倒“U”形，细胞核为卵圆形。中段较粗，与头部紧紧相连，主要由中心粒和线粒体等构成。线粒体位于宽大的核膜中，围绕在远端中心粒周围，形状为卵圆形，透射电镜下可观测到5个线粒体。尾部为细长鞭毛，轴丝为典型“9+2”结构，外侧有波浪形侧鳍。成熟卵子呈卵圆形或近圆形，直径为(140.63±2.09)μm,透射电镜下可见明显的细胞核，核内有核仁，成熟的卵黄颗粒电子密度深且均匀，卵黄颗粒周围存在大量的脂滴。【结论】明确了疣吻沙蚕成熟精子及卵子的超微结构特征，为理解其生殖细胞发育、受精机制提供了重要的形态学基础。
2024年06期 v.53 792-796页 [查看摘要][在线阅读][下载 1499K] [下载次数：238 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ]
- 胡应平;林冬梅;胡弘正;吴颖;谭兆玲;刘斌;林占熺;
【目的】通过研究旱稻内生固氮菌的生理特性，筛选出具有较强固氮和促生特性的菌株，为生物菌剂的开发提供依据。【方法】采用联合固氮固体培养基培养方法，从成熟期旱稻的根、茎、叶、谷粒中分离内生固氮菌，并进行系统进化分析、形态学鉴定、生理生化鉴定以及促生作用和拮抗禾谷镰刀菌等特性的研究。【结果】获得27株内生固氮菌，涵盖3个门，分别为芽孢杆菌门、变形菌门和放线菌门。其中，芽孢杆菌门的芽孢杆菌属为优势菌。从根中分离的URR05和URR37菌株经革兰氏染色呈紫红色，其余菌株呈紫色。所有菌株均能够利用葡萄糖，属于发酵型细菌，且为嗜温型微生物，最适温度为30～45℃,具有固氮、分泌生长素和1-氨基环丙烷羧酸脱氨酶、产铁载体、溶磷等特性。枯草芽孢杆菌URR64的固氮酶活性和吲哚-3-乙酸的质量浓度最高，分别为253.82 U·L~(-1)和19.19 mg·L~(-1);斯特氏杆菌URS02分泌的1-氨基环丙烷羧酸的质量浓度最高(1 031.43 ng·mL~(-1)),且显著高于阳性对照组(褐球固氮菌)。1.03×10~8 CFU·mL~(-1)的混合联合固氮菌对旱稻幼苗具有显著促生效果，芽孢杆菌属固氮菌对禾谷镰刀菌具有显著的拮抗作用。【结论】旱稻内生固氮菌群较为丰富，且具有多种功能。
2024年06期 v.53 797-807页 [查看摘要][在线阅读][下载 1977K] [下载次数：1340 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 包靖玲;叶超杨;林池源;李文;范水生;
【目的】探究土地利用变化对福建省碳储量的影响，预测不同土地利用情景下的碳储量，为该区域土地规划与合理利用提供依据。【方法】基于福建省2000—2020年土地利用数据，分析2000—2020年福建省碳储量变化及其对土地利用变化的响应；采用PLUS模型预测2030年福建省土地利用格局，并用InVEST模型评估2030年碳储量。【结果】(1)2000—2020年福建省耕地面积减小了1 758.44 km~2,建设用地面积增大了3 105.50 km~2。(2)2000—2020年福建省碳储量和碳密度均呈逐年下降的趋势，碳储量减少了13.02 Tg,碳密度降低了1.06 Mg·hm~(-2);碳储量的空间分布存在显著差异，呈西北部与中部高、东南部低的分布格局。(3)福建省碳储量多情景预测结果显示：2030年在自然演化和粮食安全情景下福建省碳储量较2020年分别减少4.27 Tg和2.12 Tg,仅在生态保护情景下增加5.29 Tg。碳储量变化的区域主要集中在山区和沿海平原。【结论】合理的土地利用规划与生态保护措施有助于提高福建省碳储量。
2024年06期 v.53 808-815页 [查看摘要][在线阅读][下载 2942K] [下载次数：1039 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：0 ] - 李晓东;苏连波;王克勤;宋娅丽;李芸;胡淳;
【目的】探究氮沉降下土壤酶活性、化学性质的变化，了解滇中高原森林土壤养分的循环状况。【方法】以滇中亚热带云南松(Pinus yunnanensis)林为研究对象，设置对照(CK,氮沉降为0),以及低氮(LN,10 g·m~(-2)·a~(-1)氮沉降)、中氮(MN,20 g·m~(-2)·a~(-1)氮沉降)和高氮(HN,25 g·m~(-2)·a~(-1)氮沉降)3个处理，进行氮沉降模拟试验。【结果】LN、MN、HN处理的蔗糖酶(invertase,Inv)活性提高了7.45%～14.04%,脲酶(urease, Ure)活性下降11.16%～27.17%,酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)活性下降5.18%～16.67%,过氧化氢酶(catalase,CAT)活性下降7.22%～23.35%;土壤酶活性均呈显著的时间梯度变化(P<0.05),Inv和Ure分别在氮沉降时间为31、29月时达到最低值和最高值；ACP和CAT活性均在氮沉降时间为33月时达到最高值。随着氮沉降水平的提高土壤pH值，有机碳、全磷含量分别下降1.59%～4.79%、21.25%～45.96%和17.68%～46.15%;土壤全氮和硝态氮含量分别在MN、HN处理达到最高值。不同土层土壤酶活性和土壤化学性质的分布特征均表现为0～5 cm土层>5～10 cm土层>10～20 cm土层；氮沉降下不同土壤酶活性之间的相关性较高(P<0.05);土壤pH、氨态氮与Inv活性呈显著正相关(P<0.05);土壤有机碳和全磷含量与Ure、ACP和CAT活性呈显著正相关(P<0.05)。【结论】氮沉降增强了土壤酶活性之间的相关性，改变了土壤的环境因子，进而改善了土壤中养分元素的循环状况。
2024年06期 v.53 816-824页 [查看摘要][在线阅读][下载 2077K] [下载次数：391 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 韦兴兰;孙丽娟;郭焕仙;茶晓飞;董琼;
【目的】探讨旱季降雨变化对树番茄苗木生长及化学计量特征的影响，为树番茄苗木在旱季的栽植培育提供水分管理理论依据。【方法】以一年生树番茄苗木为研究对象，设置3个降雨量，即降雨量减少40%(W-)、平均月降雨量(W)和降雨量增加40%(W+),并设置3 d(T)和6 d(T+)的降雨间隔期，比较不同降雨量下树番茄苗木的生长情况及碳(C)、氮(N)、磷(P)在树番茄苗木各器官中的分配规律。【结果】随着降雨间隔时间的延长和降雨量的增加，树番茄苗木的苗高和地径均显著增加；生物量随降雨量的增加呈现先上升后下降的趋势。在延长降雨间隔时间的情况下，各器官的碳、氮、磷含量随降雨量增加而升高。在降雨量减少40%的情况下，树番茄苗木根与叶的C∶N和C∶P比值高于其他处理，表明其根与叶受到磷的限制，其余处理则受到氮的限制。【结论】在旱季，增加单次降雨量是对树番茄苗木进行水分管理的最佳方法。
2024年06期 v.53 825-832页 [查看摘要][在线阅读][下载 2467K] [下载次数：152 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 陈秋帆;陈德令;李成荣;王妍;范永斌;
【目的】探讨苔藓植物生物学特征与黏壤土水分蒸发的关系，为研究我国西南石漠化区生物结皮对区域水文格局的影响提供依据。【方法】以大灰藓(Hypnum plumaeforme)、牛舌藓(Anomodon viticulosus)、小石藓(Weissia controversa)、蕊型真藓(Bryum arachnoideum)4种苔藓为研究对象，设置种植组和覆盖组为处理，裸土组为对照，模拟不同处理的水分蒸发过程，探讨水分蒸发特性。【结果】(1)蒸发前4种苔藓植物种植组和覆盖组的土体质量显著大于裸土组；蒸发结束时覆盖组和种植组的累计蒸发量均显著大于裸土组(P<0.05);4种苔藓植物土体水分蒸发量大小表现为蕊型真藓>牛舌藓>小石藓>大灰藓。(2)4种苔藓植物土体在水分蒸发Ⅰ阶段均以苔藓植物效应为主导效应，促进水分蒸发；土壤效应则抑制水分蒸发。水分蒸发Ⅱ阶段以土壤效应为主导效应，促进水分蒸发；苔藓植物效应则抑制水分蒸发。水分蒸发Ⅲ阶段：苔藓植物效应和土壤效应值均趋于0。4种苔藓植物土体水分蒸发Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段的维持时间具有差异性，其中，牛舌藓和蕊型真藓水分蒸发Ⅲ阶段的开始时间较其他两种苔藓植物迟。(3)累计蒸发量与苔藓植物效应呈正相关；苔藓植物效应与假根密度、饱和吸水率呈正相关，与糙率呈负相关。【结论】黏壤土表层苔藓植物总体上能促进水分蒸发；4种苔藓植物土体水分蒸发能力为0的时间点具有差异性。
2024年06期 v.53 833-840页 [查看摘要][在线阅读][下载 2147K] [下载次数：266 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]